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    科普 | 帶你走進牛血清白蛋白(BSA)的世界

    發布時間:2022-11-10 22:27:47來源:儀器信息網

    BSA(牛血清白蛋白)又稱第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是Edwin J. Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術得到5種組份,其中第五種就是白蛋白),英文名稱為Bovine Serum Albumin,簡稱BSA。


    1.如何選擇合適的BSA
    由于牛血清白蛋白(BSA)具有多種產品樣式,可滿足不同種的應用。目前網上的信息大多模棱兩可,市場上有低脂肪酸級、低內毒素級、微生物級、試劑級、診斷分析級等多種BSA,因此如何選擇合適的BSA產品是很重要的前提。

    1.微生物級別
    用于細胞培養、動物疫苗生產、傳染致病菌培養基添加劑。

    2.低內毒素級別
    用于普通細胞培養、組織培養,作為干細胞培養的添加劑,作為無血清培養基載體以及作為營養添加劑。

    3.低IgG級別
    用于制備單克隆抗體,Southern和Northern印跡雜交實驗,可作為EIA和RIA以及常規免疫實驗的封閉液。利用親和層析方法去除免疫球蛋白,確保在下游實驗中不會與抗體結合。在免疫分析實驗中不會被檢測到。每個批次的牛血清白蛋白的IgG含量不高于0.05 mg/g。

    4.低脂肪酸級別
    用于體外胚胎移植,也可作為胚胎移植的飼養層營養物以及表面活性添加劑??捎糜诔R幍募毎囵B及組織培養。作為干細胞培養的添加劑,作為無血清培養基載體以及作為營養添加劑。利用親和層析法去除脂肪酸以及其他小分子。每個批次的牛血清白蛋白的脂肪酸含量不高于0.05 mg/g。

    5.標準級別
    對蛋白酶敏感的免疫分析實驗,如:RIA,EIA,熒光,化學發光分析;蛋白標準品,稀釋液;蛋白,結合物和酶穩定劑;核酸雜交實驗;細胞培養。

    除了多種產品類型外,BSA的生產工藝更是被劃分為3種:Cohn分餾法、熱休克法和色譜層析法。


     

    6.BSA的應用

    牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應用,例如:

    1、在PCR體系中有助于Taq酶的穩定性及活性,可以提高PCR的效率。

    2、ELISA中也常常用到,比如封閉液,樣本稀釋液,酶結合物稀釋液都可以用BSA。

    3、生化研究,遺傳工程和藥物研究。

    4、血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。

    5、在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。

    除了以上提及的BSA應用方向外,當然還有其他實驗中運用到,不妨來看看~
     

     應用1:瘧原蟲培養

    體外連續培養的瘧原蟲是研究瘧原蟲的重要工具,然而用于維持瘧原蟲生長所必需的新鮮人血清卻很難獲得。研究人員發現,在惡性瘧原蟲培養基中加入含脂豐富的牛血清白蛋白可有效替代人血清,適用于紅細胞內期瘧原蟲的體外連續培養[1]?;驅⑷搜迮c含脂豐富的牛血清白蛋白按一定比例混合加入瘧原蟲培養基中,瘧原蟲可達到與全人血清培養相似的生長狀態,這樣就減少了對新鮮人血清的完全依賴[2]。

    結論:與其它品牌的高脂牛血清白蛋白相比,MP Biomedicals色譜層析法的牛血清白蛋白(除低脂肪酸級以外)的總脂含量大約是它們的總脂含量的2.5倍,因此廣泛應用于瘧原蟲的體外培養[3]。高脂含量的牛血清白蛋白不僅有利于細胞培養,對于研究人員,也可減少膽固醇濃縮物或其它添加劑的使用,能顯著增加細胞滴度。

     

     應用2:肝癌的研究

    高濃度的游離脂肪酸(Free fatty Acids,FFAs)和腫瘤壞死因子(TNF-α)會改變細胞活動過程,引起脂毒性。研究人員發現,細胞內的脂質累積會降低游離飽和脂肪酸的脂毒性。因此,為了開發出有效治療復雜及多種影響因素引起的疾病的治療方法,尋找能調節多個細胞過程的基因,研究人員建立了一個模型,將人肝癌細胞(HepG2)置于高濃度FFA和TNF-α的生理環境中。整個實驗分為對照組,BSA組,棕櫚酸酯組,油酸酯組及亞油酸酯組,然后檢測加入不同FFA的細胞中的甘油三酯(TG)累積,毒性和基因應答情況[4]。

    結論:研究結果發現一些參與調節脂質累積及細胞毒性的基因,這些參與多個細胞過程調控的基因有望成為對抗復雜疾病的理想候選作用靶點。

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